他汀类药物疗效及毒副基因检测（SLCO1B1,APOE）

一、他汀类药物的临床应用 随着生活水平提升，血脂异常人群占比逐年增高，长期高血脂是高血压、脂肪肝、脑梗塞、冠心病、心肌梗死等心脑血管及代谢疾病的重要诱因。他汀类药物，即3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶抑制药，不仅能强效地降低总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL），而且能一定程度上降低三酰甘油(TG)，还能升高高密度脂蛋白(HDL)，所以他汀类药物也可以称为较全面的调脂药。 常见的他汀类药物有洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、瑞舒伐他汀、阿托伐他汀和氟伐他汀等。 二、他汀类药物的潜在不良反应  他汀类药物临床应用中可能出现多种不良反应，核心包括肌毒性、肝酶异常升高、肝脏及肾脏损伤，还可能引发高血糖、认知功能障碍，以及失眠、消化不良、腹泻、恶心等胃肠道和神经系统不适。 三、药物基因检测对他汀类用药的指导意义 药物的疗效与不良反应受患者年龄、性别、体重、基础疾病等多种因素影响，其中遗传因素占核心作用，相关研究显示约60%的个体用药差异性由基因决定。不同患者的药物代谢相关基因型存在差异，会导致药物代谢速度不同，进而引起血药浓度改变，最终造成药物疗效不佳或引发不良反应、药物毒性。 药物基因检测以药物代谢酶、转运体等遗传多态性为基础，从基因组水平分析基因序列多态性与药物疗效、不良反应的关联，明确药物在人体内的有效性及不良反应发生风险，以此指导临床个体化合理用药，提升用药的安全性与有效性，实现临床获益最大化。 四、他汀类药物相关核心基因及检测价值 一. SLCO1B1基因多态性与肌毒性：  SLCO1B1基因位于人类12号染色体，参与编码肝脏细胞表面摄取他汀类药物的载体即OATP1B1，OATP1B1在肝脏细胞基地外侧膜表达，调节他汀类药物从门静脉血液中进入肝脏细胞内，也就是说OATP1B1为他汀转运过程中的关键酶，在他汀药物代谢中负责将血液中的药物转移至肝脏直接发挥药效或代谢转化成为有活性的物质。 而SLCO1B1的不同基因型与他汀转运能力有关，携带转运能力差的突变基因型可以造成他汀类药物在血液中含量升高，则有可能引发患者获肌病的风险。 SLCO1B1：2个位点，4个单倍体型    *5、*15会使OATP1B1转运功能降低，致使他汀类药物血药浓度升高，增加不良反应风险。 指南共识：首次服用他汀类药物，用药前应检测SLCO1B1基因多态性，以减少药物不良反应发生； 二、ApoE基因多态性与疗效  APOE基因则位于19号染色体，编码载脂蛋白E通过多种途径参与机体的脂质代谢调节，是影响机体血脂水平的重要内在因素。 ApoE基因多态性影响血清TC、TG水平，进而影响他汀类药物的降脂效果。他汀类药物通过影响肝细胞表面低密度脂蛋白受体（low-density lipoprotein receptor，LDL-R）的表达使其反馈性增加，使血液中TC及LDL-C清除增加、水平降低，ApoE作为配体与LDL-R结合，从而影响他汀类药物降脂疗效。 ApoE基因:2个位点，3个单倍体，6种基因型。  指南共识：首次服用他汀类药物，为评估他汀类药物治疗效果，建议在用药前检测ApoE基因多态性； 五、他汀类药物个体化用药建议 参考文献：《SLCO1B1和ApoE基因多态性检测与他汀类药物临床应用专家共识》

真菌三项核酸检测

一、项目介绍 真菌三项核酸检测，使用荧光PCR法检测引起侵袭性真菌感染的三种主要真菌病原体：曲霉菌属、新型隐球菌、耶氏肺孢子菌。标本类型推荐：BALF和痰液，全天均可接收，2-8℃保存。该检测可快速精准检出致病真菌病原体，可用于早期常见真菌菌属分型诊断并可充分考虑定植与致病菌区分。 二、易感人群 侵袭性真菌感染的易感人群为免疫力低下患者，多发生在血液、ICU、移植、肿瘤以及呼吸和感染领域，其中主要包括： 1、血液科病人，如骨髓移植、白血病和淋巴瘤患者等； 2、感染和呼吸科病人，主要集中为艾滋病、呼吸衰竭和免疫功能低下的患者； 3、ICU和移植病人，多为实体器官移植，大型手术和胃肠外营养的患者； 4、实体肿瘤病人，多为接受过放化疗的患者。 三、国内外指南和专家共识 （一）PCR检测方法在国内外指南/共识中的推荐意见 指南/共识 内容 2016 IDSA曲霉病诊断及治疗指南 PCR检测应结合患者自身状况和临床背景，并结合其他检测进行 2017 ESCMID-ECMM-ERS曲霉病的诊断和管理指南 适度支持使用血液、BALF、CSF进行PCR检测来诊断LA（推荐等级：BⅡ） 推荐用BALF标本进行曲霉PCR及GM试验联合检测 2019 EORTC-MSG侵袭性真菌病诊断与治疗指南（首次推荐） 无菌组织标本PCR阳性结果可作为确诊侵袭性丝状真菌及酵母菌感染的确诊依据 血浆、血清、全血、BALF连续≥2次PCR阳性结果可作为侵袭性曲霉菌病的临床诊断依据 血浆、血清、全血≥1次PCR阳性＋BALF连续≥1次PCR阳性可作为侵袭性曲霉菌病的临床诊断依据 呼吸道标本PCR阳性可作为肺孢子菌感染的临床诊断依据 2022 侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用专家共识（首次推荐） PCR检测方法中荧光定量PCR检测灵敏度高，适用于检测临床标本中低丰度的真菌DNA，对曲霉、肺孢子菌和念珠菌检测中有应用前景 二代测序方法推荐应用于疑难病例，不推荐常规开展 （二）共识中关于G试验、GM试验及PCR检测的相关内容     曲霉菌属 隐球菌 肺孢子菌 G实验 国内共识 ------ ------ 血清阳性结果可作为侵袭性肺孢子菌病的临床诊断证据 国外共识 ------ ------ GM实验 国内共识 血清、血浆、BALF或CSF阳性结果可作为侵袭性曲霉菌病的临床诊断依据 ------ ------ 国外共识 血清、血浆、BALF或CSF阳性结果可作为侵袭性曲霉菌病的临床诊断依据 ------ ------ PCR检测 国内共识 荧光PCR方法灵敏度高，可作为诊断方法之一 二代测序不推荐常规开展 疑难病例可进行BALF二代测序 荧光PCR方法灵敏度高，可作为诊断方法之一 二代测序不推荐常规开展 国外共识 石蜡包埋组织标本阳性结果可作为确诊依据 血浆、血清、全血、BALF阳性结果可作为侵袭性曲霉菌病的临床诊断依据 石蜡包埋组织标本阳性结果可作为确诊依据 呼吸道标本标本阳性结果可作为临床诊断依据 四、结果解释 在患者的宿主因素及临床表现均符合的基础上，同时排除检测方法的干扰因素，结果解释参照下表： G实验 GM实验 PCR检测 结果解释 + + + 考虑肺曲霉感染 + - + 考虑肺孢子菌感染 + - - 考虑其他真菌感染，需进一步明确 + + - 可能为曲霉菌感染，标本中的靶核酸低于最低检测限，需再次检测 考虑其他真菌感染，需进一步明确 - + + 结合患者自身状况（严重免疫缺陷、粒细胞减少等），考虑肺曲霉感染 - + - 可能为曲霉菌感染，标本中的靶核酸低于最低检测限，需再次检测 考虑其他真菌感染，需进一步明确 - - + 考虑肺隐球菌感染 - - - 考虑其他真菌感染，需进一步明确 PCR方法对于侵袭性真菌感染的诊断不受患者免疫状态及抗真菌药物治疗等因素的影响。

高血压用药指导基因检测

高血压防控形势 在我国高血压不仅是患病人数最多的慢性非传染性疾病，也是导致居民心血管疾病发病和死亡风险增加的首要且可改变的危险因素。流行病学数据显示，按照收缩压（SBP）≥140mmHg（1mmHg=0.133kPa）和/或舒张压（DBP）≥90mmHg的诊断标准，2012至2015年我国18岁及以上成人高血压粗患病率为27.9%，估计成人高血压患者人数约为2.45亿。与此同时，我国高血压知晓率、治疗率和控制率分别为51.6%、45.8%和16.8%，总体仍处于较低水平，我国高血压防治任务依然艰巨。 二、高血压防控现状 高血压的发病机制复杂，除了遗传因素，肥胖、高盐饮食、缺乏运动、抽烟、酗酒、精神压力等都与之有关。我国的高血压患病率居高不下，临床上的降压药物并不少，但血压控制的达标率却很低。临床常用的降压药物血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）、血管紧张素II受体阻滞剂（ARB）、β受体阻滞剂、钙离子拮抗剂（CCB）和利尿剂五大类。不同个体对于药物反应的差异性很大，影响因素包括年龄、并发症、营养状况、遗传背景、药物相互作用及环境等，其中遗传背景的影响尤为重要。药物进入人体内，经过吸收、转运、代谢、效应及清除的过程发挥作用，携带不同基因型的患者在上述药物作用过程中可能呈现反应的程度不同，表现为药物反应性的个体差异。通过检测药物代谢酶和药物靶点基因，可指导临床医生针对特定患者选择合适的降压药物和给药剂量，提高降压药物治疗的有效性和安全性。 三、高血压个体化用药相关规范及指南 2013年，国家卫生计生委发布关于《印发医疗机构临床检验项目目录（2013版）的通知》，明确将高血压用药相关基因CYP2D6、CYP2C9、ADRB1、AGTR1、ACE的检测列入用药指导的分子生物学检验项目。 2015年，卫计委发布《药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南（试行）》，建议对高血压用药相关基因CYP2D6、CYP2C9、ADRB1、ACE进行检测，并对采样、检测、报告解释及质控等进行了相应规范。 2017年，卫计委合理用药专家委员会及中国医师协会高血压专业委员会发布《高血压合理用药指南（第2版）》，明确提出：不同个体对于药物反应差异巨大，高血压用药时应该考虑药物基因组学因素。 四、高血压治疗药物及相关基因 1.血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI） 血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）作用于肾素-血管紧张素-醛固酮血压调节系统（RAAS），通过竞争性地抑制血管紧张素转换酶（ACE）而发挥降压作用。常见的代表药物有：依那普利、卡托普利、贝那普利、福辛普利及咪达普利等。自20世纪80年代上市以来，该类药物降压作用显著，应用范围广泛。研究表明，该类药物的代谢与ACE基因的多态性密切相关。ACE基因有三种基因型：II（插入纯合子）、ID（插入缺失杂合子）和DD（缺失纯合子），白种人、黑种人和亚洲人群中D等位基因频率分别为56.2％、60.3％和39.0％。ACE基因多态性可影响血浆ACE的水平，DD基因型个体血浆ACE的活性升高，依那普利治疗后ACE活性下降更明显；在初治的高血压患者中，DD型患者福辛普利的降压疗效增强；在高血压合并左心室肥大和舒张期充盈障碍的患者中，DD基因型患者服用依那普利和赖诺普利后心功能改善程度优于ID和II基因型患者；II基因型患者应用赖诺普利或卡托普利时肾功能下降更明显，应注意监测肾功能。 2.血管紧张素受体拮抗剂（ARB） 与ACEI类似，血管紧张素受体拮抗剂（ARB）也作用于RAAS系统，降压和心血管保护作用也类似。但ARB与ACEI相比，作用于血管紧张素II受体的水平更充分，能更直接阻断RAAS，避免了「AngII逃逸现象」，具有较好的降压效果，无ACEI的干咳、血管紧张性水肿等不良反应。ARB代表药物有：缬沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、氯沙坦等。该类药物目前已成为一线降压药物，在临床广泛使用。AGTR1是血管紧张素II的特异性受体，对血压调节起着重要作用。研究表明，ARB类药物的敏感性与AGTR1基因有关，其中，AGTR1A1166C的多态性研究最多，共有三种基因型：AA型、AC型、CC型。有证据表明，C型等位基因会导致血管紧张素受体增加，使用ARB类药物更敏感。CYP2C9属于细胞色素P450氧化酶「超家族」中的重要成员，参与多种药物的代谢，包括ARB类药物。CYP2C9基因存在广泛的遗传变异，其中以CYP2C9*2、*3最为常见，中国人群中CYPC2C9*2的频率为0％，CYPC2C9*3的频率为3％。CYP2C9*3为外显子7上的突变，该突变导致酶活性降低，携带这类等位基因的患者在接受CYP2C9底物药物治疗时，容易发生严重的不良反应。以氯沙坦为例，携带CYP2C9*3等位基因的个体服用氯沙坦后，氯沙坦的代谢率降低，其降压作用下降，需适当增加用药剂量以增强降压疗效。 3.β-受体阻滞剂 β-受体阻滞剂作用于肾上腺素系统，通过选择性地与β受体结合产生多种降压效应，如降低心输出量、减少肾素释放及中枢交感神经冲动等。常见药物有：阿替洛尔、美托洛尔、比索洛尔、卡维地洛等。研究表明，该类药物的敏感性与ADRB11165G＞C基因多态性有关，对应三种基因型：GG、GC和CC。其中，C型等位基因携带者使用该类药物敏感性更高，降压效果更好。该类药物的代谢主要与CYP2D6基因多态性有关，目前已发现CYP2D6基因有70多种遗传变异，不同突变类型对酶活性和药物代谢的影响不一。中国人群中CYP2D6常见的导致酶活性降低的等位基因包括CYP2D6*3、CYP2D6*4、CYP2D6*5和CYP2D6*10，等位基因频率分别为1％、1％、6％和53％。携带以上基因突变的患者使用β-受体阻滞剂，会影响其疗效，并增加不良反应的发生，临床需根据个体的基因型进行剂量的调整。 4.利尿剂 利尿剂用于降压治疗已逾半个世纪，降压效果好，价格低廉。该类药物主要通过利钠排尿、降低血容量负荷发挥降压作用。临床上应用最多的是噻嗪类利尿剂，代表药物有：氢氯噻嗪、吲达帕胺。研究表明，利尿剂的敏感性主要与NPPA T2238C基因多态性有关，对应三种基因型：TT、TC、CC，其中C型等位基因携带者对利尿剂更敏感。 5.钙通道阻滞剂（CCB） 钙通道阻滞剂（CCB）主要通过阻断血管平滑肌细胞上的钙离子通道，扩张血管从而降低血压。该类药物作为抗高血压治疗药物已用于临床多年，降压疗效卓越、联合降压潜能广泛。该类药物代表有：氨氯地平、尼群地平、硝苯地平、拉西地平等。该类药物的敏感性与NPPAT2238C基因多态性有关，TT型携带者使用该类药物更敏感。而该类药物的代谢主要与CYP3A5基因多态性相关，其中突变型CYP3A5*3会导致酶失去活性，对CCB代谢能力降低，降压效果受影响。 通过检测患者高血压药物基因的多态性，可实现“量体裁衣”式的高血压治疗，不仅可以为临床选择合适的药物种类及药物剂量提供相关遗传学证据，还可以减少同一种疾病药物的服用种类，有助于提高药物疗效、降低药物不良反应，同时减轻患者的痛苦和经济负担。 【样本类型及采样方法】： EDTA抗凝管（紫帽管），静脉血≥2ml。 【检验申请及送检地点】 在系统搜索点击“高血压用药指导基因检测”； 样本送检两院区检验科。 联系电话：0314-2270205          

血清HBV RNA定量检测

据WHO《2024年全球肝炎报告》数据显示，2022年全球慢性乙型肝炎感染者约2.54亿人，全年约130万人死于病毒性肝炎，其中83%由乙型肝炎引发。慢性乙肝的临床治愈仍是尚未攻克的难题，其核心症结在于乙肝病毒（HBV）进入人体后，会在肝细胞核内形成稳定的共价闭合环状DNA(cccDNA)，这是HBV难以彻底清除、疾病慢性化的关键原因。 目前临床将HBsAg、HBeAg和HBV DNA持续转阴作为慢性乙肝理想治疗终点，但该指标无法完全反映肝细胞核内cccDNA的清除状态，也难以精准预测停药后疾病复发风险，导致多数患者需长期甚至终身服药。而cccDNA的直接检测需行肝穿刺，临床操作难度大、依从性低，因此寻找能精准反映cccDNA转录活性的血清学标志物，成为慢性乙肝诊疗的核心需求，血清HBV RNA定量检测正是这一需求下的关键检测手段。 一、血清HBV RNA检测：指南重磅推荐的新型分子标志物 血清HBV RNA作为反映肝内cccDNA转录活性的特异性血清学标志物，其临床价值已被多部国内外权威指南认可，且指南进一步强化了其在慢性乙肝诊疗中的一线应用地位： 1. 我国《慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）》欧洲肝病学会（European Association for the Study of the Liver，EASL）的《乙型肝炎病毒感染管理临床实践指南（2017 年版）》均指出，血清HBV RNA水平可反应肝组织 cccDNA 转录活性有关，与患者的病毒学应答及预后相关，在评估 NAs 停药后复发风险方面值得深入研究； 2. 2019 年 EASL 和 美 国 肝 病 学 会（American Association for the Study of Liver Diseases，AASLD）联合发表的HBV治疗终点会议报告中，也提出将血清HBV RNA作为cccDNA存在和转录活性的测定指标； 3. 我国《慢性HBV感染者血清HBV RNA检测及临床应用的专家共识》明确，对于未经抗病毒治疗或经 NAs治疗的慢性 HBV 感染患者，血清 HBV RNA 有望作为反映肝内cccDNA定量或转录活性的标志物。在预测NAs 停药后复发风险方面有着不错的表现。 二、血清HBV RNA检测的临床应用 1. 慢性乙肝患者DNA转阴后，HBV RNA可持续疗效监测 HBV DNA阴性患者中，HBV RNA仍有相当比例阳性患者，且随治疗时间逐步转阴，可作为疗效监测指标，填补DNA监测盲区。 2. 预测核苷（酸）类似物（NAs）停药后复发风险 NAs治疗过程中HBV DNA低于检测下限时，可进一步检测HBV RNA。当NAs需要停药时，血清HBV RNA转阴的患者停药后复发风险更低。 3. 预测干扰素治疗的应答效果 应用干扰素治疗的患者，在基线、12周和24周测HBV RNA，可以预测干扰素应答效果。HBV RNA低滴度水平，使用干扰素获得应答可能性高；HBV RNA高滴度水平，使用干扰素获得应答可能性低。 4. 血清HBV RNA预测肝细胞肝癌的发生 HBV RNA与肝癌发生风险相关性优于DNA，HBV RNA阳性或较高水平，肝癌累积复发率越高，总生存率越低。控制HBV DNA与HBV RNA双阴性结果，肝癌发生率更低。 三、血清HBV RNA检测的方法 乙型肝炎患者检测传统的血清学标志物是：血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)和HBV DNA。HBsAg的水平可反映疾病分期与进展风险；HBeAg是病毒复制的重要指标；HBV DNA反映肝内病毒的复制活性。HBV RNA作为肝内cccDNA的替代标志物，用于监测慢性乙肝患者的疾病进展，即在血清HBV DNA检测阴性的患者中，通过HBV RNA仍可实现对病毒活性的监测。HBV RNA在乙型肝炎的治疗和病情评估中具有重要作用，能够为医生提供准确诊疗依据，为患者制定个性化诊疗方案。 当前HBV RNA常见检测技术有两种，SAT技术（直接定量）和RT-PCR技术（间接定量）。SAT技术特异性提取和扩增样本中的HBV RNA，不受DNA的干扰，具有更高的检测灵敏度及准确性。 参考文献 [1] Liu S,Zhou B,Valdes J D,et al.Serum hepatitis B virus RNA:a new potential biomarker for chronic hepatitis B virus infection[J].Hepatology,2019,69(4):1816-1827. [2] Guo JT, Guo H. Metabolismfunction of hepatitis B virus cccDNA: Implications for the development of cccDNA-targeting antiviral therapeutics. Antiviral Res. 2015;122:91-100. [3] Xia Y, Guo H. Hepatitis B virus cccDNA: Formation, regulationtherapeutic potential. Antiviral Res. 2020;180:104824. [4] 中华医学会感染病学分会，中华医学会肝病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）. 中华肝脏病杂志，2019，27(12):938-961. [5] European Association for the Study of the Liver. EASL 2017clinical practice guidelines on the management of hepatitis B virus infection[J]. J Hepatol, 2017, 67(2): 370-398. [6]张缈曲，张琪然，张寒悦,等. 一种新型乙型肝炎病毒RNA定量检测方法的临床检测性能评估. 中华传染病杂志，2020，38(12):782-785. [7]黄晨璐,许伟,胡乾坤,等.实时荧光核酸恒温扩增试验和定量反转录-聚合酶链反应对血清乙型肝炎病毒RNA定量检测的一致性评价[J].微生物与感染,2020,15(03):158-165.